氨基酸自动分析仪多用于食品、农产品、生物样本等基质中氨基酸组分的测定,样品前处理是整个检测流程的重要环节。试样经过提取之后,往往会夹杂蛋白质大分子、脂类、细小颗粒、色素等干扰物质,这类杂质会污染仪器色谱系统,造成管路堵塞、基线异常、分离效果变差等问题。针对不一样的样品基质,选用适配的提纯过滤手段,能够去除干扰组分,保障检测结果稳定可靠。
开展前处理工作之前,需要做好样品的前期准备。采集到的试样需要做好保存,避免样品内氨基酸组分发生降解。样品研磨、粉碎操作要充分,保证后续提取过程中目标物质可以充分溶出。完成提取操作得到提取液之后,试样内部会留存各类杂质,需要根据基质本身的组成特点,选择对应的提纯与过滤手段,不能套用统一的处理流程。
对于植物类基质试样,例如谷物、果蔬、中药材等,样品提取液中常会含有植物多糖、色素、细小植物碎屑以及部分大分子物质。这类试样在过滤之前,可以先进行静置,让部分固体颗粒沉降,减少过滤介质的负担。过滤环节可选用适配的过滤材料,滤除悬浮固体残渣。试样当中存在的色素、多糖类干扰物,会对仪器检测带来干扰,需要借助提纯步骤加以去除。可以选用合适的固相净化材料,对提取液进行净化处理,吸附掉色素、多糖等干扰组分,减少杂质进入仪器。处理完成之后,再次进行过滤,去除净化过程产生的细小悬浮物,得到澄清的待测溶液。

动物源性基质试样,像肉类、水产、乳制品,样品提取液中会含有较多蛋白质、脂肪类物质。这类基质处理,需要先完成蛋白沉淀步骤,将大分子蛋白从溶液中分离出来。沉淀完成后,溶液内部会存在沉淀絮状物,需要先进行初步离心,把大部分固体沉淀分离,取上层清液开展后续操作。离心之后的上清液依旧会残留少量细微絮状颗粒,需要经过过滤处理。过滤操作过程要注意,过滤材料不能吸附氨基酸组分,防止目标物质出现损失。如果试样中含有较多油脂,需要提前除去脂类成分,油脂会附着在过滤介质表面,造成过滤受阻,还会污染仪器流路。
生物体液类试样,例如血清、组织浸出液,基质组分相对复杂,含有蛋白、小分子代谢物以及少量悬浮微粒。这类试样不宜使用强净化手段,避免造成氨基酸组分流失。一般先通过离心去除细胞碎片与大颗粒杂质,取上清液进行过滤。过滤时选用孔径合适的滤膜,滤除微小悬浮颗粒。该类试样不建议进行过多的提纯操作,过多的处理步骤会改变试样内氨基酸的含量,带来检测偏差。
食品加工制品基质,例如调味品、发酵制品,试样提取液会含有大量小分子杂质、胶体物质。部分发酵样品还会存在胶体悬浮物,单纯过滤很难wan全去除。可以先通过离心处理,分离胶体沉淀,再配合过滤操作。如果试样内存在较多可溶性干扰物,可采用固相净化方式选择性吸附干扰物质,净化完成后再次过滤,保证进入仪器的溶液澄清透亮。
过滤操作过程中,有几点需要注意。过滤操作要避免引入外来污染,过滤器具需要提前清洗干净,防止残留物质混入待测液。过滤时不要用力挤压过滤介质,挤压会把细小颗粒挤过滤膜,达不到过滤效果。过滤完成的待测溶液,要尽快上机检测,长时间放置容易出现组分变化。
提纯过滤完成之后,还需要做好试样的状态核查。观察待测溶液是否澄清,若依旧存在浑浊现象,需要重新开展净化过滤。如果试样出现浑浊就直接进样,细小颗粒会进入氨基酸自动分析仪内部,堵塞管路与色谱柱,缩短部件使用时长,还会造成基线波动,干扰峰形识别。
在实际实验工作中,样品基质差异较大,需要结合试样本身的物质组成,灵活选用提纯与过滤组合方式。不要一味增加净化步骤,过度处理会造成氨基酸组分损失,也不要简化处理流程,任由杂质进入仪器。做好不同基质试样的提纯过滤,能够减少仪器故障,降低检测误差,为氨基酸自动分析仪的测定工作提供合格的待测样品。